›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (10): 577-580.
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代炜，徐中飞，秦兴军，谭学新
摘要： ［摘要］ 目的 检测Smad相互作用蛋白1(SIP1)在人舌癌Tca8113细胞系中的定位及融合蛋白的表达鉴定。 方法 PCR扩增SIP1编码序列的全长，克隆到pCMV-Flag-MAT-Tag 1载体。利用共聚焦激光扫描显微镜观察SIP1和SIP1-Flag在人舌癌Tca8113细胞系中定位，并将构建好的Flag标签SIP1(SIP1-Flag)真核表达载体转染到人舌癌Tca8113细胞系中,提取蛋白进行Western blot检测,利用Flag标签抗体进行免疫沉淀纯化SIP1-Flag融合蛋白。结果 构建了SIP1-Flag真核表达载体。SIP1和SIP1-Flag融合蛋白主要定位于人舌癌Tca8113的细胞核中，Western blot检测到SIP1-Flag融合蛋白表达，且在人舌癌Tca8113细胞中成功纯化SIP1-Flag蛋白。结论 成功构建真核表达载体。SIP1和SIP1-Flag主要定位于细胞核，成功鉴定融合蛋白表达并纯化SIP1-Flag融合蛋白。
