目的 探讨T-box转录因子1(T-box transcription factor 1,TBX1)对人牙髓间充质干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨分化的调控作用及其潜在机制。方法 体外使用慢病毒转染技术构建TBX1敲低的hDPSCs模型,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测成骨诱导早期细胞分化活性,通过茜素红S(alizarin red S,ARS)染色观察成骨晚期矿化结节的形成情况;并结合Western blot及RT-qPCR检测关键成骨分化标志物Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COL1)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)及Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)在蛋白及mRNA水平的表达变化。收集成骨诱导第7天条件培养基进行人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外成管实验,同时采用RT-qPCR检测hDPSCs血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、血管生成素-1(angiopoietin-1,ANG1)、血小板衍生生长因子B(platelet-derived growth factor subunit B,PDGFB)的mRNA表达水平。体内采用裸鼠皮下异位成骨模型,随机分为对照组(consh)与TBX1敲低组(TBX1sh),分别于背侧皮下植入转染consh或TBX1sh的hDPSCs与羟基磷灰石/磷酸三钙(HA/TCP)材料构建的复合材料,通过HE染色比较对照组与TBX1敲低组新生骨的形成差异,通过免疫组化染色检测成骨分化相关蛋白RUNX2、骨钙素(osteocalcin, OCN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)及血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule,CD31)表达。结果 体外实验发现,敲低TBX1显著增强hDPSCs的ALP活性、矿化结节形成及成骨分化相关标志物(COL1、OSX、RUNX2)表达(P<0.05),VEGFA、ANG1、PDGFB的mRNA水平显著上调(P<0.05),其条件培养基亦显著促进HUVECs管状结构形成(P<0.05)。体内实验证实,TBX1敲低组裸鼠皮下新生骨组织形成增加(P<0.05),成骨分化相关蛋白表达上调(P<0.05),CD31免疫组化染色显示微血管密度及积分光密度值均显著高于对照组(P<0.05)。结论 TBX1是hDPSCs成骨分化的负向调控因子,敲低TBX1可有效促进hDPSCs成骨分化,其机制可能与增强细胞促血管生成能力、改善局部微环境有关。